卵泡刺激素生物测定法-中国药典

卵泡刺激素生物测定法-中国药典

卵泡刺激素生物测定法　　本法系比较尿促性素标准品（S）与供试品（T）对幼大鼠卵巢增重的作用，以测定供试品中卵泡刺激素的效价。　　溶剂的制备    试验当日，称取牛血清白蛋白适量，加0.9%氯化钠溶液溶解，制成每1ml中含1mg的溶液，充分溶解后，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.2±0.2。　　精密称取已知效价的绒促性素（原料或粉针剂均可），加入上述溶液中溶解，制成每1ml中含20单位的溶液，混匀备用。　　标准品溶液的制备    试验当日，按尿促性素标准品中卵泡刺激素的标示效价，用上述溶剂，按高、中、低剂量组（dS3、dS2、dS1）配成3种浓度的标准品溶液，相邻两浓度之比值（r）应相等，且不得大于1∶0.5。一般高浓度的标准品溶液可制成每1ml中含2～5单位。调节剂量使低剂量组卵巢明显增重，高剂量组卵巢增重不致达到极限。标准品溶液置2～10℃贮存，可供3日使用。　　供试品溶液的制备    按供试品中卵泡刺激素的标示量或估计效价（AT），照标准品溶液的制备法制成高、中、低（dT3、dT2、dT1）3种浓度的供试品溶液，相邻两浓度之比值（r）应与标准品相等，供试品与标准品各剂量组所致反应平均值应相近。　　测定法    取健康合格，出生19～23日，或体重36～60g，同一来源的雌性幼大鼠，一次试验所用大鼠的出生日期相差不得超过3日，或体重相差不得超过15g；按体重随机等分成6组，每组不少于8只，每日于大致相同的时间分别给每鼠皮下注入一种浓度的标准品溶液或供试品溶液0.5ml，每日一次，连续注入3次，于最后一次注入24小时后，将动物处死，称重，解剖，摘出卵巢，，剥离附着的组织，去除输卵管，用滤纸吸去周围的液体，直接称重（天平精密度0.1mg）并换算成每10g体重的卵巢重，照生物检定统计法（通则1431）中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。　　本法的可信限率（FL%）不得大于45%。