首页 >> 实验指南 >>生物化学 >> 生长激素生物测定法 中国药典2020版四部通则1219
详细内容

生长激素生物测定法 中国药典2020版四部通则1219

中国药典2020版四部通则1219

生长激素生物测定法


       1.去垂体大鼠体重法

  本法系通过比较生长激素标准品(S)与供试品(T)对幼龄去垂体大鼠体重增加的程度,以测定供试品效价的一种方法。
  标准品溶液的制备    试验当日,取标准品,按标示效价用含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化钠溶液,制成高、低两种浓度的标准品溶液。一般高浓度标准品溶液配成每1ml含0.1~0.2IU,低浓度标准品溶液配成每1ml含0.025~0.05IU,高低两浓度比值(r)一般为1∶0.25,标准品溶液分装成每天剂量并密封于-15℃以下保存,临用时融化。
  供试品溶液的制备    按供试品的标示效价或估计效价(AT),照标准品溶液的制备及保存方法制备和保存。
  测定法     取同一来源、品系,出生26~28天,体重60~80g,同一性别,健康的大鼠,试验前2~3周手术摘除垂体,手术后于屏障环境饲养使其恢复。
  取去垂体手术后2~3周、体重变化小于手术前±10%的大鼠,按体重随机等分成4组,每组至少8只,每只编号并记录体重。分别自颈部皮下注射一种浓度的标准品溶液或供试品溶液0.5ml,每日1次,连续6日。于最后1次给药后24小时,处死大鼠,称体重,必要时实验结束后可进行尸检,切开蝶鞍区,肉眼检查有无垂体残留,剔除有垂体残存的大鼠。每只动物给药后体重增加的克数作为反应值。供试品与标准品各剂量组所致反应的平均值应相当。照生物检定统计法(通则1431)中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。
  本法的可信限率(FL%)不得大于50%。
  2.去垂体大鼠胫骨法
  本法系通过比较生长激素标准品(S)与供试品(T)对去垂体大鼠胫骨骨骺板宽度增加的程度,以测定供试品效价的一种方法。
  标准品溶液和供试品溶液的制备    同体重法。
  测定法    本法可与去垂体大鼠体重法同步进行。待体重法实验结束后,取下两腿胫骨,置10%甲醛溶液保存,从胫骨近心端顶部中间沿矢状面切开,置10%甲醛溶液中保存,水洗10分钟后,置丙酮溶液中10分钟,水洗3分钟,置2%硝酸银溶液中染色2分钟,水洗后置水中强光照射至变棕黑色,于10%硫代硫酸钠溶液固定30秒,置80%乙醇溶液中供测量用。测量时沿刨面切1mm左右薄片,置显微镜下测量胫骨骨骺板宽度,作为反应值。照生物检定统计法(通则1431)中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。
  本法的可信限率(FL%)不得大于50%。


购物流程

支付/配送

售后服务

关于我们

微信订货

  Copyright @ 2011-2022. All rights reserved. 天津西玛科技有限公司 版权所有

津ICP备20004793号-1

发货查询
E-mail:
19725998@qq.com;sales@sima-lab.com
QQ:957983659;
QQ:956277045

电话/传真:022-58201211