O157显色培养基 O157 chromogenic medium
用途:用于O157菌的显色培养,O157菌显亮红色、淡红色或红色
应用范围:大肠杆菌O157:H7显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、病人粪便样品中O157:H7菌的快速检测。O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈,大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色。本培养基的特异性高,可以克服SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
配方(g/L):
特殊营养物质 68.4
混合显色剂 2.6
琼脂 15.0
pH7.0±0.1 25℃
CT添加剂 1ml/支*5(已配套,无需另购)
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法:
称取本品 17.2g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 2 分钟左右。冷却至 45-50℃ 时,加入一支CT添加剂混匀,倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
操作步骤:
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC肉汤或mTSB肉汤中,36℃ 增菌培养 18-24 小时;
3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到O157菌显色培养基上,做 2 个平板;
4、36℃ 培养 18-24h,O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;
5、对典型菌落可做O157:H7菌血清学试验和全套生化试验。
注:必须在 36℃ 培养 24 小时内判读结果,以免菌落颜色发生变化。
质量控制:
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈灰白色。制备好的平板呈蓝色固体培养基。
2、微生物试验
在 36℃ 培养 18-24h 小时:
质控菌株
ATCC
生长情况
菌落颜色
大肠杆菌O157
35150
+++
亮红色
金黄色葡萄球菌
25923
-/+
黄色或无色
大肠杆菌
25922
+/-
暗蓝色,菌落周围有蓝色晕圈
沙门氏菌
14028
+++
蓝色
奇异变形杆菌
12453
+/-
无色
肺炎克雷伯氏菌
10031
+/-
蓝色,菌落周围有蓝色晕圈
弗氏柠檬酸盐杆菌
43864
+/-
蓝色菌落有紫色中心,菌落周围有蓝色晕圈
阪崎杆菌
29004
++
紫色至蓝色
方法的局限性:
本培养基上的典型大肠杆菌O157:H7必须做血清学试验或生化试验。
典型特征:
典型大肠杆菌O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;
O157显色培养基
大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC35150
O157显色培养基
大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC43888
贮存:
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效:
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意:
此培养基仅供实验室使用。
参考文献:
1、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
2、 U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD.