细菌总数显色培养基 Total Genes Chromogenic Medium
用途:用于快速、准确检测细菌总数,培养24小时,细菌显红色
应用范围:细菌总数显色培养基用于快速检测食品、水质和环境中的细菌总数。菌落显红色、淡红色。
配方 (g/L):
特殊营养物质
8.4
显色剂
0.1
琼脂
15.0
pH 6.9-7.1 25 ℃
用法:
称取本品 23.5 克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃待用;
倾注法:
取适当稀释度的样品液1ml加入无菌平皿中,再加入冷却好的培养基约15ml,混合均匀,待培养基完全凝固后,36±1℃培养24~48h进行计数;
涂布法:
取冷却至45-50℃培养基,倾入无菌平皿,待培养基完全凝固后,在36±1℃的培养箱中倒置放置1-2小时,加入适当稀释度的样品液1ml,涂布于培养基上,36±1℃培养24~48h进行计数。
贮存:
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效:
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤:
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36±1℃培养24~48h,选用有30~200个菌落的平板,计数平板上出现的红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计数)。
质量控制:
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2、微生物试验
在36±1℃培养24-48h:
质控菌株
ATCC
生长情况
菌落颜色
单增李斯特氏菌
19114
+++
红色
金黄色葡萄球菌
25923
+++
红色
大肠埃希氏菌
25922
+++
红色
沙门氏菌
14028
+++
红色
肺炎克雷伯氏菌
10031
+++
红色
方法的局限性:
本培养基用于菌落总数计数时,有些菌落可能会显无色,但都应计数在总数内
典型特征:
典型菌落为红色至淡红色。
参考文献:
• FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
• KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962).