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蛋白类药物的肽图

肽图分析

快速、准确的蛋白质序列测定

肽图分析是生物治疗药物表征过程中的关键步骤。通过蛋白质消化到其组成肽的生物药物的所谓“自下而上”的表征是必要的,能够确保生物药物分子的完整序列覆盖。

从药物发现和开发到临床试验阶段再到生物生产和 QA/QC,肽图分析仍然是关键分析方法。我们提供创新技术的独特组合,包括从头到尾的工作流程,旨在实现快速、可靠、可重现和易于使用的方法。

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在蛋白质药物产品的质控要求中,需要对蛋白氨基酸序列进行确证,对相关修饰进行鉴定以及定量——即肽图分析。肽图的液质实验流程主要包括:蛋白的变性、二硫键的还原与烷基化、以及蛋白酶酶解(通常使用胰蛋白酶 Trypsin)、液质联用数据采集、数据处理几个步骤( 图1 ) 。在这个流程中,Orbitrap 型质谱以其超高分辨、高质量精度、高灵敏、高稳定性成为业内推崇的质谱分析平台。除此之外,考虑到生物制药应用的特殊需求, 根据蛋白药物质谱分析特点,Thermo Fisher与世界级制药领军企业Amgen联合开发了Biopharma Finder软件。实际上,Biopharma Finder来源于Amgen内部的自制的肽图分析软件,因此其功能设计从一开始就听从了一线分析人员的切实需求, 而Thermo Fisher的加入,则使软件底层对质谱数据处理的性能大大提高。因此,Biopharma Finder一经公开发布,就受到了业内的极大关注与好评。

除最基本的肽段序列确认、覆盖率分析、修饰位点鉴定与定量、错配二硫键发现、图谱对比、CID/HCD/ETD碎片解析等功能外,Biopharma Finder还独具未知修饰发现、氨基酸突变查找功能。这两项功能可以帮助大家快速发现序列变异,避免可能出现的巨大的质量风险。不仅如此,Biopharma Finder还有更多贴心的功能设计,如内置了CHO细胞系糖型,并可一键选择进入糖肽分析流程;再如,除具有肽段鉴定可信度评价功能外,还可智能显示多肽的理论质谱碎片,并用于与实验图谱直观对比,以辅助分析,并可快速提高分析员质谱解析水平。这些功能不但减少工作强度,也降低了对分析员理解质谱数据深度的要求。更具情怀的是,对于氨基酸固定修饰设置,不同于其它类似软件(固定修饰只可精确至某一类氨基酸),在Biopharma Finder中,可以精确到特定的某个氨基酸位点。此功能对于蛋白药的某些特殊分析需求提供了极大的便利。

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